






腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒,在自然界分布广泛,至少存在100种以上的血1清型。其***组长约36kb,两端各有一个反向末端重复区(ITR),ITR内侧为病毒包装信号。***组上分布着4个早期转录元(E1、E2、E3、E4)承担调节功能,以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期***E2产物是晚期***表达的反式因子和copy必须因子,早期***E1A、E1B产物还为E2等早期***表达所必须。因此,E1区的缺失可造成病毒在copy阶段的流1产。E3为copy非必须区,其缺失则可以大大地扩大插入容量。腺病毒载体大多以5型(Ad5)、2型(Ad2)为基础,新增了55型(Ad55),很多研究机构在研究当中,55型将比5型流行以及应用更具广泛性。

电1击法
电1击法基本原理是电脉冲使细胞膜产生可逆性的“微孔”,外源DNA可通过这些微孔进入受体细胞原生质体内。
1985年Fromm等用electric shock法将pat***导入了玉米原生质体,得到了该***稳定表达的愈伤***。随着玉米原生质体再生技术的研究取得进展,1988年Rhodes等用electric shock法转化玉米原生质体,初步获得了完整的转0***植株。electric shock法还可以对幼胚、愈伤***和胚性悬浮细胞系进行遗传转化。1992年D’Hallum K等以玉米幼胚和愈伤***为受体,用electric shock法导入neo***,获得了可育的转0***植株,并且neo***能稳定地遗传给后代。1993年Sukhapinda等用electric shock法转化从玉米花粉愈伤***分离的原生质体,将gusA和nptⅡ转入原生质体,获得单倍体转化植株。1994年Laursen等以果胶降解酶处理悬浮细胞系后,通过electric shock法导入bar***,也获得了可育的转0***玉米。
电1击法操作简单,不受宿主限制,在遗传转化技术研究的初期得到了较为广泛的应用,但是它的转化效率较低,而且对有壁细胞或***的转化效果较差。
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