蛋白质二硫键异构酶-友名生物公司(图)

蛋白表达科学研究

rBPI56或其功能性氨基端片段通常在真核细胞中表达，将有助于获得具有生物学活性抗G菌重组蛋白。但因该种表达方式存在成本高、表达量低等问题而影响其实际应用。用原核细胞表达BPI23-Fcγ1重组蛋白   。

Profinity eXact融合标签表达系统：利用bio-rad rofinity eXact 系统制备无标签、N 端无任何其它残基 的重组蛋白只需大约1 小时。该亲和介质较为稳定，可多次用于目的蛋白的纯化，蛋白质二硫键异构酶，从而节约了 成本。适用于纯化以不溶的聚集体形式存在的重组蛋白。Profinity eXact 融合标签系统的有效性和一致性将使其成为获得高产率无标签重组蛋白的通用平台。

蛋白质含量测定方法之双缩脲法（biuret法）

实验原理双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。

紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：***铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。

此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分准确的蛋白质测定。    

跨膜蛋白（TP），也称为整合膜蛋白，占膜蛋白总量的70%~80%。其主要特征是不溶于水，其氨基酸组成疏水性强，也有亲水性氨基酸，由疏水性氨基酸组成的部分，深入脂双层的疏水区，与脂肪酸链共价结合，它们可分布在脂双分子层中或跨越全膜。跨膜蛋白在基本生理过程中起着重要作用，包括分子运输、信号转导和能量利用等。一方面，它们可用于向细胞传递外部环境的信号。另一方面，它们充当接收1器收集有关外部环境信号。

***组序列中有将近30％的***编码跨膜蛋白，其中50％是目前已知药1物的靶标。但由于跨膜蛋白表达和纯化非常困难，市面上关于重组的跨膜蛋白种类并不是很多。