几种酶的比较及限制酶
1几种酶的比较
(1)限制性内切酶:作用于DNA分子，切割磷酸二酯键，形成黏性末端或平末端。
(2) DNA连接酶:作用于DNA分子片段，mRNA切割酶，连接磷酸二酯键，形成重组DNA分子。
(3) DNA聚合酶:作用于脱氧核苷酸，连接磷酸二酯键，形成新的DNA分子。
(4)解旋酶:作用于DNA分子，作用于氢键，形成DNA分子的单链。
2.限制酶:
(1)一种限制酶通常只识别一种特定的碱基序列，但是有少数限制酶却可以识别不止
一种碱基序列。
(2)不同限制酶也可以识别同-碱基序列;
(3)不同限制酶识别的碱基序列虽然不同，但切出的末端也可能相互连接。
错位切割含目的***的DNA部分片段和运载体一形成黏性末端
单酶切：同一种限制酶分别切割含目的***DNA部分片段与运载体。这是较简单的一种方法，含目的***的DNA部分片段与运载体在同种限制酶作用下形成相同的黏性末端，这两个黏性末端间能通过碱基间的配对而连接，进而形成重组DNA分子。
用同裂酶去切割含目的***DNA部分片段与运载体。有一些来源不同的限制酶识别核苷酸顺序和切割位置都相同，这类酶称为同裂酶(同切酶或异源同工酶)。同裂酶产生同样的切割，形成相同的黏性末端。
限制酶有什么作用？
在DNA重组技术中，限制酶主要用于：
1.在特异位点上切割DNA，产生特异的限制酶片段；
2.建立DNA分子的限制酶图谱；
3.构建***文库；
4.用限制酶切出的相同的粘性末端，以便重组。
5.许多***用切割外来DNA的方法进行自我保护，如切割感1染性噬菌体的DNA.这些***产生一种能切割DNA的核酸内切酶，一旦发现外来DNA便将其切割，因此它们有效地限制了噬菌体对***的感1染，故这种核酸内切酶被称为限制酶.
6.每种限制酶特异识别专一DNA序列，并在切割位点将其准确切割.
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