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1.将处理好的样本、研磨球依次加入离心管中;
2.将装好样品的离心管放入适配器中;
3.将带有样品的适配器放入液氮中冷冻数分钟;
4.将冷冻后的样品和适配器放在夹具中间,调整好位置;
5.将夹具放在样品台上,***槽***,旋紧垂直***旋钮,安全锁归位;
6.盖上仪器的安全门;
7.设置振动频率、振动时间;
8.启动仪器,执行破碎过程;
9.等待仪器完全停止振动后关机,打开安全门,取出样品;
10.仪器的归位。


以下内容是由北京旭鑫盛科有限公司提供,希望对同行业有所帮助!
每50~100mg ***加入0.2体积 TRIzol
1.加钢球1颗,设置研磨仪参数:12单位振频,液氮研磨仪,1min,每种样品基本充分匀浆
2. 将上述匀浆液每0.2体积 TRIzol ***用量的匀浆液中加入0.04体积氯方,盖紧管盖,手动剧烈震摇15 秒钟,然后室温静置2~3 分钟。
3. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。
4. 小心吸取上层水相(无色)加入到新试管中,同时计算所吸取的水相体积。不必过多吸取,防止吸入DNA和蛋白杂质(中间层,白色)。
5. 加入所吸取水相等体积预冷的异丙淳,自动液氮研磨仪,盖紧管盖,轻轻摇匀。
6. 室温静置10 分钟,待RNA 充分沉淀(为减少RNA 降解,此步骤可省略)。
7. 4℃ 10,000g 离心10 分钟。
8. 将上清弃除(注意别丢弃沉淀),每管加入0.2体积75%乙醇润洗,盖紧管盖,轻轻晃动试管,以去除残留的异丙淳和盐份。4℃ 7,自动液氮研磨仪,500g 离心5 分钟。
9. 将上清弃除(注意别丢弃沉淀),打开管盖,将RNA 沉淀干燥(室温挥发或真空干燥)。注意RNA 沉淀不可完全干燥,国产液氮研磨仪,否则难以溶解。
10. 将RNA 沉淀溶解于适量的无RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全,将使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于进一步实验,或者-70℃保存。


***研磨仪实验解决的问题
1、仪器研磨相对于手工研磨工作时更省力方便,实验更安全,研磨速度更快;相比较于手工研磨,一次研磨的样品量更多,出样量增加,时间周期缩短;
2、仪器研磨出料颗粒相较于手工研磨更细腻均匀,出料量也有明显提升;
3、对样品保护好,提取出的***成分在数量和质量上比手工研磨效果更好;
4、不会出现,实验更省心。

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