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武汉友名生物技术有限公司

普通会员5
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企业等级:普通会员
经营模式:商业服务
所在地区:湖北 武汉
联系卖家:董先生
手机号码:18627191036
公司官网:www.umebio.com.cn
企业地址:湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701
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企业概况

武汉友名生物(U-MeBiotech)技术有限公司成立于2009年5月18日。公司致力于为广大科研工作者提供品质的生命科学产品和**、有效的技术服务。公司对所有岗位员工都经过了严格的培训,对所销售的产品及其使用都比较熟悉。同时,在公司内部定期开展自我提高学习培训,由各岗位员工对所销售的产品进行系统培......

内切酶-武汉友名生物公司(图)

产品编号:1000000000010519528                    更新时间:2022-03-31
价格: 来电议定
武汉友名生物技术有限公司

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  • 主营业务:商务服务
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董先生 18627191036

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产品详情






限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。它可分为三类:

Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲1基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA,而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子,内切酶,然后从底物上解离。

Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(限制酶),它切割某一特异的核苷酸序列; 另一种为***的甲1基化酶,它修饰同一识别序列。Ⅱ类中的限制性内切酶在分子克1隆中得到了广泛应用,它们是重组DNA的基础。绝大多数Ⅱ类限制酶识别长度为4至6个核苷酸的回文对称特异核苷酸序列(如EcoRⅠ识别六个核苷酸序列:5"- G↓AATTC-3"),有少数酶识别更长的序列或简并序列。Ⅱ类酶切割位点在识别序列中,有的在对称轴处切割,产生平末端的DNA部分片段(如***aⅠ:5"-CCC↓GGG-3");有的切割位点在对称轴一侧,产生带有单链突出末端的DNA部分片段称粘性末端,如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。





限制酶有什么作用?

在DNA重组技术中,限制酶主要用于:

1.在特异位点上切割DNA,产生特异的限制酶片段;

2.建立DNA分子的限制酶图谱;

3.构建***文库;

4.用限制酶切出的相同的粘性末端,以便重组。

5.许多***用切割外来DNA的方法进行自我保护,如切割感1染性噬菌体的DNA.这些***产生一种能切割DNA的核酸内切酶,一旦发现外来DNA便将其切割,因此它们有效地限制了噬菌体对***的感1染,故这种核酸内切酶被称为限制酶.

6.每种限制酶特异识别专一DNA序列,并在切割位点将其准确切割.





蓝白斑筛选鉴定

  用于克1隆的酶还须通过额外的质量鉴定――蓝白斑筛选鉴定,以确定经酶过量消化后DNA末端的完整性。该种鉴定方法为:用酶10倍过量消化适当的载体上lacZ***中单一的酶切位点,连接,转化,并涂XGal/IPTG/Amp平板。成功地切割、连接和表达b-galactosidase可以说明克1隆后***是完整的,一个完整的***产生蓝斑,一个不完整的***(例如,降解的DNA末端)产生白斑。在进行蓝白斑鉴定中,所有的限制性内切酶产生的白斑数量不应超过3%。




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