甲胎蛋白(AFP)是一种胎儿特异性糖蛋白，分子量约70，000～72，000道尔顿^，在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成，正常人血中含量甚微。1972年有人首0次报道开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的AFP。若胎儿羊水中AFI’值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿，亦见于其他多种畸形，如先0天性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺发育不全等。1983年发现母体血0清AFP水平的降低与唐氏***有密切关系一。因此制备高0效特异的AFP单克0隆抗0体(McAb)具有重要的意义。
结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后，尾静脉采集少量血液，分离血0清，进行间接ELISA测定抗0体效价，多抗制备佐剂，检测结果见图1。由图中数据可知，新的改良免0疫方法，在第二次免0疫后，抗0体效价即达到1：104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13．0版)进行t检验，统计结果差异极显著(P(0．001)。
二、两种免0疫方式小鼠融合率比较
在细胞融合后约7～10 d可见孔内杂交瘤细胞生长，当细胞融合成片达孔底面积的35％～50％时，用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短，但获得的抗0体效价更高。
饲养层细胞制备
于细胞融合前一天，准备饲养层细胞，常选用小鼠腹腔渗出细胞，其中主要是巨噬细胞和淋巴细胞。应用腹腔渗出细胞的好处是: 一方面做饲养细胞，另一方面巨噬细胞可以吞噬死0亡的细胞和细胞碎片，为融合细胞的生长造成良好的环境。腹腔细胞的数目应适宜，过少则不能提供杂交瘤细胞所需要的生长因子，过多会阻碍杂交瘤细胞的贴壁，一般以铺满孔底 30% 为好。
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