QuickShuttle-Hela-博特龙公司(图)

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

重要提示

1. 与常规转染***不同，使用 QuickShuttle 可在贴壁细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染（立传立转），从而可节省 18~24 小时的转染前细胞培养时间。

2. QuickShuttle 极大简化了转染操作，转染***和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血0清或更换培养基，整个转染操作可在一分钟内完成。

3. 立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得部分使用 QuickShuttle 的转染实验可在细胞传代后 24 小时内完成，从而比常规转染***节约 24~48 小时。

1. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中，轻摇细胞板或用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。在极0少情况下会出现贴壁细胞脱落现象，可先从待转染细胞孔中吸取 500μl 培养基与转染复合物预混后再加入细胞中。若在细胞瓶中进行转染，直接加入到无细胞贴壁的对面或侧面并摇匀即可。

2. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注：无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。

3. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

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磷酸钙沉淀法

磷酸钙沉淀法师基于磷酸钙-DNA复合物将DNA倒入真核细胞的转染方法。磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与ba细胞表面的结合。当核酸以磷酸高-DNA复合物的形式出现时，可使DNA附在细胞表面，利于细胞的吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内。进入细胞的DNA仅有1%-5%可以进入细胞核中，QuickShuttle-Hela，其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合，在细胞中进行稳定表达，***转导的频率约为10-4，这项技术能用于任何DNA导入哺乳动物细胞进行暂时性的表达或长期的转化研究。