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上海必泰生物科技有限公司

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手机号码:18621924707
公司官网:bestest.cn.china.cn
企业地址:三林镇506弄
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企业概况

上海必泰生物科技有限公司是一家经相关部门批准注册,主要经营生物实验仪器、耗材的高科技企业,代理GE旗下Whatman公司的定量滤纸,定性滤纸﹑玻璃纤维滤纸,石英纤维滤纸,色谱纸和离子交换纸,杂交纸,3MM层析纸过滤器有针头式滤器,多层针头式滤器,囊式过滤器.过滤漏斗萃取柱,萃取套管,层析填料,析纸,......

MilliporeImmobilon-Ny带正电尼龙转印膜INYC00010

产品编号:1000000000011121135                    更新时间:2022-04-12
价格: ¥4031.00
上海必泰生物科技有限公司

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  • 主营业务:whatman;PALL;Millpore;实验耗材
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刘英瑛 18621924707

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产品详情


概述

Millipore 提供了一种用于核酸应用转印膜选择。 使用带正电的 Immobilon-Ny+ 转印膜可以在 Southern blotting,Northern blotting 和 colony/plaque lifts 实验中获得出色的结果。 Immobilon-NC 硝酸纤维素转印膜,是主要的 Southern 和 colony/plaque 实验方案中***初使用的膜,也可作为一种灵敏度较低但更经济的选择。

Immobilon-Ny+ 带正电尼龙转印膜

Immobilon-Ny+ 是一种带正电的尼龙转印膜,非常适合于可靠与可重现的转移、固定、杂交及随后的重复杂交实验。 其表面均一分布的正电荷密度确保得到的灵敏度和***低的背景信号。 此膜经强化处理具有超长的耐久性,这一点对于重复杂交试验至关重要。

可提供详细的实验方案,在使用 Immobilon-Ny+ 转印膜时可用于优化转印结果。


  • 灵敏度,而背景信号***小

  • 非常出色的重复杂交特性

  • 在化学发光法和***性检测系统中均表现出色


性能

Southern Blotting


直接比较三种带正电尼龙膜在各自优化实验方案下的表现:每种膜在其推荐的紫外波长照射下交联。 Immobilon-Ny+ 转印膜的杂交信号是其它两种膜的 2 倍。

12 次重复杂交之后的信号强度


尼龙膜在 254 nm 交联,并进行了多次重复杂交,依次为:用 32P 标记探针做 2 次杂交,4 次模拟杂交,用 32P 标记探针做第 7 次杂交,然后进行 5 次模拟杂交以及用 32P 标记探针做第 13 次杂交。 在每个杂交周期之间,将膜置于 0.4M NaOH 溶液中,在 45°C 下洗提 30 分钟。 模拟杂交与真实杂交完全一样,区别在于未加 32P 标记探针。 在整个重复杂交过程中,Immobilon-Ny+ 的信号强度是竞争产品 A 和 B 的两倍。

检测灵敏度


将凝胶上 DNA 的量减少到 0.01 ng。 0.1 lane(条带)中的 2.2 和 2.0 kbp 带分别与 DNA 的 0.48 和 0.42 pg 相对应。 大约相当于 10 µg 人类***组 DNA 中一个单拷贝***序列。 可通过对探针浓度加倍来提高灵敏度。 在 0.01 ng 条带中,与竞争产品 A 相比,Immobilon-Ny+ 转印膜灵敏度稍高,而背景信号更低。

用化学发光检测进行 Northern Blotting


鼠肝的全部 RNA (1 µg) 在甲醛琼脂糖凝胶中电泳分离,然后通过毛细作用转印到 Immobilon-Ny+ 转印膜和竞争产品带正电尼龙膜 “A”。 与烘焙相比,通过紫***联固定RNA 能增强信号。 Immobilon-Ny+ 转印膜比竞争产品 A 表现出更高的灵敏度。

Colony Lifts


将载有 pUC19 或 pLH2(2.0 kbp λ 噬菌体 DNA Hind III 片段***至 pUC19)的 JM109 混合***悬浮液置于琼脂培养皿中,在 37°C 下培养过夜。 将培养皿在 4°C 下冷却30 分钟,将菌落(直径大约 1–2 mm)转印至一片 82 mm 直径的 Immobilon-Ny+ 圆片膜上,或转印至竞争产品带正电的尼龙膜上。 膜上的 DNA 在254 nm, 60,000 µJoules/cm2 紫外光照射下 交联。 然后用 a 32P 标记的 DNA 探针对膜进行杂交,并使用磷屏成像系统显色。

Immobilon-NC 转印膜

Immobilon-NC 转印膜是一种经济型选择,用于核酸和蛋白质印迹实验方案。 这种***转印膜,是 Southern、colony/plaque 以及蛋白质实验方案中***初使用的膜。 NC HATF 所含的混合纤维素酯基质,不含在细胞生长过程中会干扰细胞壁完整性的表面活性剂。 这些膜用于 colony lifts。 NC HAHY 所含的混合纤维素酯基质,所带的表面活性剂能够增强可湿性以及转印过程中的处理能力。 两种膜对核酸和蛋白质都具有高吸附容量。 适用于常规转印。


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