




过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度***粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原***。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫***前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的***作用。

沉淀型TMB单组份(HRP底物)
即用型,用于标记物为HRP的WB实验。TMB在辣根过氧化物酶的催化下与氧化剂反应生成水溶性的蓝色产物,此产物可被沉淀出来用于免0疫印记(WB)实验。本品具有非常高的灵敏度,特别适用于需要较高信噪比的实验。TMB是一种非致***性底物,不易褪色,优于DAB、AEC和4-CN。
Catalog_no BF06009
Product_name 沉淀型TMB单组份(HRP底物)
Category WB、IHC、ELISA相关***
操作步骤
石蜡切片
1. 脱蜡:二甲0苯,室温,2 次,每次 5~10min。
2. 水合 100%、100%、95%、90%、80%、70%乙醇、蒸馏水,每级 3min。
3. 在洗涤缓冲液中润洗 10min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)
5. 继续通用步骤。
冰冻切片
1. 空气中干燥切片,至少 1hr
2. 用前用合适的固定液固定,如果要延长保存时间,protein a残留检测(***盒),固定后在空气中干燥 1hr。 单独包装在铝箔袋中,–70°C 干燥保存,用前从冰箱取出,室温放置至少 1hr。
3. 浸入洗涤缓冲液中 10~15min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)。
5. 继续通用步骤。
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