
与HLH(G或A)L相比,这些突变体随着时间的推移(在°C下)具有更高的热稳定性。HLHSLI活性位点的分子模型表明,Ser在位的存在有利于与Asp 的相互作用,这对于稳定链A或B的Asp 和链B或A的Arg 之间的桥似乎很重要。产物的对映体过量(ee ) 表明存在一种主要的对映体,表明TKgst突变体对C有高度的立体选择性控制。
先前研究表明,用作供体底物的酮糖可以被酮酸羟基酸(HPA) 取代,通过释放二氧化碳使反应不可逆。因此,TK似乎是一种强大的酶,用于不对称合成α-羟基酮(方案)。当HPA作为供体时,TK对非磷酸化短碳链α-羟基醛(C–C)表现出活性。此外,TK优先接受(R)-羟基醛,产生 (S,国产光引发剂8001稳定排名, R)α-羟基酮。发现并表征了来自嗜热脂肪地芽孢 (TKgst)的个热稳定TK,在高温下表现出高稳定性和对异常反应条件的稳健性。使用合理的诱变方法将羟基化或非羟基化醛作为受体 (,) 和脂肪族 α-酮酸作为供体,提高和扩大了 TKgst 底物特异性及其对映体偏好,确认了工程化的TKgst,其能够促进了脂肪族受体和供体底物组合的脂肪族α-羟基酮 (C-C) 的合成。
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