结果没有观察到产物的TKgst突变体文库的形成，但观察到具有几种TKgst突变体裂解物(SI) 的产物。文库HLHSLX 提供了多数量的活性TKgst突变体。基于这些结果，对个命中进行了测序，其中个显示Ile代替了Leu。Ile诱导了一个新的ThDP位置，有利于与HL的相互作用（图）。 为了进一步改进，创建另一个库，进口替代Esacure1001M实用排名，保留LI和HL，并通过S***在H位置上创建多样性，希望用非极性残基代替Ser。
非羟基化碳链长度增加的 (S)-，-二羟基酮和在型和除FI和之外的突变体中表现出低于的活性。TKgst对的活性为型的倍，这是由于Ile代替Phe，允许与的C相互作用（图）。离ThDP活性中心太远的其他残基的突变没有增强活性。较长碳链的(S)-，-羟基酮和没有获得活性或活性非常低，这可能是因为目标残基的稳定性差和与化合物-相比溶解度较低。
与（该突变体的底物）反应的原位 H NMR 研究表明， 小时后乙醇醛转化率为，并以产率形成产物，证明的C-C键被FI裂解（表）。选择HLH（S、G或A）LI三重突变体来切割，在小时后乙醇醛全部或几乎全部转化。HLHSLI性能，产物的产率为，而HLHALI为，HLHGLI为。这是因为乙醇醛自缩合形成 l-赤藓酮糖。 此外，结果显示，HLHSLI比HLH（G或A）LI的效率略高，这与这些突变体的热稳定性研究一致。
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