小鼠抗人IgG Fab-博特龙(推荐商家)

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水佐剂免0疫步骤

步骤一：用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度。备注：推荐使用的抗原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg（通常为10~20μg）；（2）免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg（通常为1~2μg）。

步骤二：充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。

步骤三：通过后腿小腿肌肉免0疫小鼠，每只小鼠100μl。备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快。

步骤四：第21天按同样方式加强免0疫一针。备注：每次佐剂和抗原现配现用。

步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定，抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内，　随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注：若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求，可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

Actin即肌动蛋白，是细胞的一种重要骨架蛋白。同时Actin在细胞分泌、吞噬、locomotion、cytopla***ic streaming和cytokinesis等过程中起重要作用。Actin在不同物种之间高度保守，以至于很难获得较好的针对actin的抗血0清。Actin大致可分为六种，其中四种是不同肌肉***特异性的，包括α-skeletal muscle actin，α-cardiac muscle actin，小鼠抗人IgG Fab，α-***ooth muscle actin，和γ-***ooth muscle actin； 其余两种广泛分布于各种***中，包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之间同源性大于90%，但在N-terminal同源性仅50%-60%，因此N-terminal常被用作actin的抗原。

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血0清的分离

如果用三角瓶或平皿盛血，将器皿倾斜放置于37oC烘箱2hr，转移到4oC沉淀过夜，第二天早上用吸管吸取血0清。如果用离心管收集，37oC烘箱放置2hr，转移到4oC沉淀过夜，第二天早上离心，10000RCF，10分钟。在血0清中加入NaN3 至终浓度0.02%，分装后-20oC保存。

小结：抗血0清获得之前要件的抗0体的效价、抗0体的特异性以及抗0体的亲和力；获得抗血0清之后，要分装保存抗血0清，一般情况下，-20度可保存数月至数年抗0体的效价都不会发生变化。抗0体的效价可以通过琼脂扩散试验和酶联免0疫吸附试验进行鉴定。