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加酶标：于各反应孔中，超氧阴离子测试盒厂商，加入新鲜稀释的酶标（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。5.　终止反应：于各反应孔中加入2M***0.05ml。6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，超氧阴离子测试盒供应，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。




使用贴壁细胞时：① 弃尽培养液，向培养皿中加入650 μl的Solution A，室温静置1分钟。注）96孔板等的每个孔中一次容纳不了650 μl 溶液时，请分数次处理细胞。② 用移液的头吹落贴壁培养细胞，取650 μl的细胞悬浮液转移至Collection Tube中。③ 加入0.8 μl的RNase A1，激烈振荡15秒钟，然后室温静置1分钟。2. 加入400 μl的Solution B，振荡混合。3. 加入1 ml的4℃预冷的Solution C，充分混匀后，12，000 rpm离心2分钟。4. 弃去上层有机相，超氧阴离子测试盒，再加入1 ml的4℃预冷的Solution C，充分混匀后，12，000 rpm离心2分钟。

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