通用步骤
加血0清封闭液
1. 去掉片子上多余缓冲液。
2. 取适量血0清封闭液完全覆盖切片。
3. 在湿盒中室温孵育 15min。
4. 浸入洗涤缓冲液中 5min。
加一抗
1. 去掉切片上的多余洗涤缓冲液。
2. 将稀释的一抗加到切片上，完全覆盖***细胞。
3. 在湿盒中室温孵育 30min。
4. 用洗涤缓冲液洗去一抗，在洗液中润洗 5min。
注：如果显色速度过快，建议进一步稀释一抗，将一抗稀释度以 1/50、1/100、1/200、1/400 和 1/800，***佳稀释度的选择是显色 10min 后阳性显色效果满意而没有背景显色。
产品说明本产品是基于鲁米诺底物的化学发光***盒，能够被辣根过氧化物酶（HRP）催化，发出强烈辉光，检测灵敏度达到 pg 级。本***盒优化了底物组成，使用了新型高0效增强剂，发光强度比传统 ECL 显色液提高了 30-100 倍，并有效地降低了背景。***盒使用新的氧化剂代替不稳定的HO，HybriMore，提高了***盒的稳定性，室温可稳定放置 1 年。工作液被 HRP 催化后，发出特定波长荧光（400-450nm），可对 X0光胶片***，也可直接使用荧光 CCD 扫描，主要应用于 Western 检测以及化学发光免0疫检测系统。
过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度***粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原***。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫***前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的***作用。
HybriMore-博特龙(推荐商家)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司位于江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前博特龙在生物制品中享有良好的声誉。博特龙取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。博特龙全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。