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1． 9 腹0水效价的测定

1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL，包被Elisa 酶标板过夜，以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照，用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价，用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳，用 制 备 的 MRJ单克0隆 抗0体 作 为 一 抗，设置抗0体稀释浓度 分别为1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。进 行Western Blot 检测。

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甲胎蛋白(AFP)是一种胎儿特异性糖蛋白，分子量约70，000～72，000道尔顿^，在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成，正常人血中含量甚微。1972年有人首0次报道开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的AFP。若胎儿羊水中AFI’值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿，亦见于其他多种畸形，如先天0性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺发育不全等∽J。1983年发现母体血0清AFP水平的降低与唐氏***有密切关系一。。因此制备高0效特异的AFP单克抗0体(McAb)具有重要的意义。

综上所述，新的改良的小鼠免0疫方法具有很好实验效果。孕妇血0清AFP水平的变化与唐氏***有密切关系。目前孕中期人绒毛膜促性腺激0素(HCG)联合AFP筛查唐氏***胎儿已成为欧美亚许多***常规服务项目之一，在假阳性率为5％左右情况下，这种筛查方案对唐氏***的检出率可以达65％～75％[9-11|。因而免0疫方法测定血0清中AFP浓度已在临床得到广泛应用。羊水和母体血0清中AFP浓度的升高，对胎儿***管缺陷和其他遗传缺陷的产前诊断，也具有应用价值。在大多数原发性肝细胞***和内胚窦***患者血0清中AFP浓度升高，检测AFP有助于肿0瘤的早期诊断，也是在治0疗过程中观察疗0效的一项指标。采用本实验新改进的方法制备AFP—McAb，对胚胎发育、***变过程中***表达、AFP的纯化、肝0***的导向治0疗以及提供诊断0***等都有重要的实际应用意义。