目前，手性羟基酮的构建于酶催化的还原、Ru-催化的迁移氢化和不对称CBS还原（Scheme ），但上述方法均存在底物适用范围窄、选择性适中或催化剂负载量高的缺点。α，α-二取代，-环二酮的单还原的挑战在于如何通过一步实现对映选择性和非对映选择性以及防止过度还原为二醇。在迁移氢化过程中，IrgacureOXE-02如何，不同的面进攻方式导致产生两对非对映异构体，并且对映选择性源于季碳与亚的区分（Fig. ）。
这种廉价、非挥发性和高反应性的共底物是通过反应混合物的原位蒸馏进一步分离脂肪醛"或 "的的候选物。反应在°C和pH .下使用纯化的WT和早先鉴定的突变体进行（表），通过 H NMR进行定期监测。通过跟踪和的消失和伴随产物和的出现，以证明的羟基乙酰基或 的酰基在乙醇醛上的转移（表）。 TKgst突变体FI较早在分析规模上被确定为候选者。
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先前的结果表明，双变体HLHS是提高对酸类似物（包括氧代丁酸）的底物亲和力的突变体。较小且极性较小的侧链代替两个组氨酸的存在允许扩大较大疏水供体底物的活性位点并保持催化机制完整。将这两个位置与Asp、Leu、Phe或 Leu上的突变连续组合。此外选择L位，它参与稳定 ThDP 的唑循环，并且还可以通过与比 Leu 更长的碳链残基相互作用来稳定脂肪族底物。创建了五个文库，HLHXDX（或 LX、或 FX 或 LX 或 LX）（表 ）。
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