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1. 原因：蛋白量太大，一抗浓度偏高和孵育时间太长；
2. 优化：根据实验需求调整上样蛋白量，调整一抗浓度和时间；
3. 解析：这种情况也是常见问题，隐球菌***，上样蛋白量一般会做预实验避免；还有容易发生的是一抗浓度太高，作用时间太长引起的，品牌一抗都有稀释比例建议；再个质量好的一抗直接37度孵育半小时就好，无需孵育过夜；再强调一遍洗膜千万不要偷懒，次数和时间洗到位，不要担心把***和蛋白洗掉没那么脆弱。
Cryopyrin antibody orb101128 PubMed 24130763 PloS one
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