非特异性条带
1. 原因：一抗有非特异性与蛋白结合；
2. 优化：更换一抗或参考“高背景”；
3. 解析：此种情况多数是因一抗不好，换一支***；设置好对照组区分目的条带；还有可能是一抗浓度过高引起的非特异性结合。
条带有边缘规则的白圈
1. 原因：转膜时膜和胶之间存在气泡；
2. 优化：转膜前去掉膜和胶之间的气泡；
3. 解析：赶气泡太容易，省略。
NLRP3调节中性粒细胞功能并***于炎0症体参与肝0脏缺血再灌注损伤。
CXCR2抗0体（FITC）orb15460 PubMed 24696236 Journal of immunology（马里兰州巴尔的摩：1950）
有shen结0石但无shen结0石的女性尿液中的细胞外小泡表现出与男性相似的模式：一项病例对照研究。
CK17抗0体（FITC）orb15384 PubMed ID:25729563性别差异生物学
条带中间出现白斑点
1. 原因：底物消耗过快，中间区底物消耗完不发光了；
2. 优化：降低蛋白量，降低一抗和二抗的浓度；
3. 解析：快速操作，在中间部位底物消耗之前就把胶光片定影出来，一般实验员很难把控制；首0选从降低蛋白量，降低一抗二抗浓度入手。
出现黑点
1. 原因：膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合；
2. 优化：封闭用的牛奶一定要纯并且完全溶解，封闭后至少洗膜一次；
3. 解析：确定封闭牛奶完全溶解，否则封闭时会导致不溶性颗粒附着在膜上，在发光时膜上会出现黑点；建议在牛奶溶解之后静止三分钟，配对***CA24-2，轻取上层牛奶液进行封闭，封闭结束常规洗膜一次；孵育一抗或二抗时，需要加牛奶的也请参照此操作。
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