快速细胞冻存液-博特龙

原位复苏方式：

1、从冰箱取出冻存培养板，立即放入37℃水浴槽中快速解冻。

2、待冻存的细胞悬液完全融化后，轻轻吸去细胞冻存液，按照常规换液操作加入新鲜培养基继续进行培养。

细胞冷冻保存方法

冻存管冻存方式：

1、按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。

2、按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。

3、取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1，000~2，000 rpm，4℃，3~5 min）。移去离心管中的上清液。

4、加入适量无血0清细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢混合均匀，制成细胞混合液。

5、将离心管中的细胞混合液分装于已标示的冷冻保存管中建议每管1ml或1.5ml。。

6、直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱，冷冻保存。

BAMBANKER? Direct无需离心收集细胞

①不需冻存前预处理，操作简便

②不需稀释，直接使用

③无需分步降温，直接使用

④可快速、长期冻存细胞（-80℃或液氮）

⑤不含血0清

BAMBANKER? Direct冻存步骤VS常规冻存步骤

　　使用本产品无需经过离心等复杂步骤，只需往培养基内添加与培养液等量的BAMBANKER

Direct，再分装到冻存管，置于-80℃便可冻存细胞。

【低温冻存实验证明以下细胞保存完好】

●　P3U1（mouse myeloma cell

line，小树骨0髓瘤细胞系）、K562（human leukemia cell line，人白0血病细胞

系）、human gastric

epithelialcells（人胃上皮细胞）、human γδT cells（人γδT细胞）；

●　Daudi（human B cell

line，人B细胞系）、PC12（rat-0derived adrenal pheochromocytoma，大鼠源shen上腺嗜铬细胞瘤）、human Bcell line（人B细胞系）；

●　OKT4（mouse hybridoma，小鼠杂交瘤细胞）、monkey B cellline（猴B细胞系）、Activated lymphocyte derived from human peripheral

blood（人外周血活化淋巴细胞）、Activated lymphocyte derived from mousespleen（小鼠脾0脏活化淋巴细胞）。

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

使用方法

1. 用37℃水浴解冻细胞冻存液，并上下振荡数次混匀。

备注：为了尽量减少污染，未使用完的细胞冻存液***好冻回-20℃，反复冻融不影响使用效果。有沉淀

属于正常情况，快速细胞冻存液，主要为DMEM高糖培养基中的脂类与盐类的析出。

2. 用细胞消化液将生长良好的细胞消化成单细胞，并用细胞计数器或血球计数板计数细胞浓度。

备注：悬浮细胞不需要消化但仍需要细胞计数，不易消化成单细胞的各种293细胞等***好使用含有EDTA

的胰酶进行消化。

3. 用低速离心沉淀细胞，弃去上清。

备注：通常2000~3000rpm离心5~10min即可。

4. 用适量细胞冻存液重悬细胞。

备注：细胞浓度可根据情况调整为1~5×106/ml，通常为3×106/ml左右。