




运输、储存和有效期
常温运输,室温避光保存,有效期 12 个月。
操作方法
苏0木0精染液细胞学染色步骤:
1. 脱蜡,水化。
2. 将***片浸入苏0木0精染液 1~2 分钟。
3. 换两次蒸馏水,每次浸入 10~20 次。
4. 蓝化:0.5~1%氨水,30 秒~1 分钟,涂片应该变蓝色。
5. 换两次蒸馏水,每次浸入 10~20 次。
6. 1%伊红水溶液 5~10 分钟
7. 蒸馏水快洗
8. 换三次 95%乙醇,每次浸入 10~20 次。
9. 换两次无水乙醇,每次浸入 10~20 次。
10. 换三次二甲0苯,每次浸入 10~20 次。
11. 封片。
过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度***粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原***。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫***前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的***作用。
1. 检测细胞或***中是否含有内源性过氧化物酶的方法:将***切片水化后,杂交瘤融合,加入底物DAB,如果变为棕色,说明***切片含有过氧化物酶,需要封闭内源性过氧化物酶活性。
2.检测细胞或***中是否含有内源性碱性磷酸酶的方法:将***切片水化后,加入底物BCIP/NBT,如果变为棕色,说明***切片含有内源性碱性酶,需要封闭其活性。
3.影响过氧化物酶的分子有血红素蛋白如红细胞中的血红蛋白,肌肉细胞中的肌红蛋白,粒细胞和单核细胞中的细胞色素及肝0脏和shen脏之中的触媒。
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