使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度（按每针次50μl用量配制）。
备注：推荐使用的抗原用量为
（1）免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg；
（2）亚单位蛋白抗原每针次1-10μg；
（3）免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg；
（4）肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。
2. 37oC水浴中解冻佐剂，充分混匀，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1混匀。
3. 通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0***免0疫小鼠，每只小鼠***100μl。
4. 第7天按同样方式加强免0疫1针。备注：每次免0疫佐剂和抗原现配现用
5. 第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4+ TH1和/或CD8+ CTL反应。
材料与方法
一、材料
AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。
二、方法
1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，3C蛋白酶，第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液，析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。
第yi组：AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma，美国)混合，充分乳化后注入8～12周龄Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量抗原加不完全福氏佐剂(Sigma，美国)腹腔***，4周后用同量抗原加不完全福氏佐剂腹腔***，融合前3 d作腹腔***加强免0疫。
DOI：搭建信息资源的桥梁
数字对象唯0一标识(digital object identifier，DOI)被形象地称为“英特网上的条形码”，如同贴了标签的商品，数字对象一旦被分配一个DOI号，无论它处于英特网上的任何位置，通过DOI都能够找到它，因此解决了传统网络标识系统的不稳定性，实现了更有效的网络链接。DOI技术即将成为国际上数字出版界构建数字信息交换平台的首要选择。
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