




ELISA***盒的应用技术
ELISA检测***盒应用定性夹心检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段,兽药残留ELISA***盒,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,兽药残留ELISA***盒厂家,这些就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与孵育结合上的HEV IgM相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,兽药残留ELISA***盒价格,只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入***溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgMelisa***盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
ELISA***盒——会出现的问题及解决办法
吸光值均偏高(或线性不够陡)。
a.原因:室温太高(>25℃)。
解决办法: 若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。
b.原因:底物溶液受到污染。
解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用。
c.原因:反应时间超过太久。
解决办法:请控制反应时间。
d.原因:酶标记物污染了盒内其它***。
解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,兽药残留ELISA***盒哪家好,可避免***间相互污染,凡是***(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)
Elisa***盒操作步骤
1、固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。
2、包被或抗原的挑选:将或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。
3、 酶标记作业浓度的挑选:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法",在正式试验体系里准确地滴定其作业浓度。
4、酶的底物及供氢体的挑选:对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。
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