




饲养层细胞制备
于细胞融合前一天,准备饲养层细胞,常选用小鼠腹腔渗出细胞,其中主要是巨噬细胞和淋巴细胞。应用腹腔渗出细胞的好处是: 一方面做饲养细胞,另一方面巨噬细胞可以吞噬死0亡的细胞和细胞碎片,为融合细胞的生长造成良好的环境。腹腔细胞的数目应适宜,过少则不能提供杂交瘤细胞所需要的生长因子,过多会阻碍杂交瘤细胞的贴壁,一般以铺满孔底 30% 为好。
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弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液,能够非常有效的诱导产生高滴度的抗0体。弗氏完全佐剂含结0核分枝杆0菌的细胞壁成分,可以加强对抗原的抗0体反应。佐剂活性来自于油滴中免0疫原的持续释放,并刺激局部免0疫反应。简单的说,弗氏佐剂的作用,这个***入哺乳动物皮下之后,会产生炎0症和疼痛。
原理
新型乳剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型油包水佐剂,用于免0疫小鼠和家兔等实验动物以制备单、多克0隆抗0体。该佐剂以弗氏不完全佐剂为基础,添加了多种具有强免0疫刺激0活性的TLR配体。新型佐剂与常规使用的弗氏佐剂相比,具有以下优点:
(1)新型乳剂活性强于弗氏不完全佐剂;
(2)与弗氏完全佐剂不同,不含有干扰免0疫应答的无关蛋白成分;
(3)安全性好,副反应率低;
(4)免0疫针次少、抗原用量低等多方面优点。

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