使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度（按每针次50μl用量配制）。
备注：推荐使用的抗原用量为
（1）免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg；
（2）亚单位蛋白抗原每针次1-10μg；
（3）免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg；
（4）肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。
2. 37oC水浴中解冻佐剂，充分混匀，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1混匀。
3. 通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0***免0疫小鼠，每只小鼠***100μl。
4. 第7天按同样方式加强免0疫1针。备注：每次免0疫佐剂和抗原现配现用
5. 第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4+ TH1和/或CD8+ CTL反应。
原理
新型乳剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型油包水佐剂，3C蛋白酶，用于免0疫小鼠和家兔等实验动物以制备单、多克0隆抗0体。该佐剂以弗氏不完全佐剂为基础，添加了多种具有强免0疫刺激0活性的TLR配体。新型佐剂与常规使用的弗氏佐剂相比，具有以下优点：
（1）新型乳剂活性强于弗氏不完全佐剂；
（2）与弗氏完全佐剂不同，不含有干扰免0疫应答的无关蛋白成分；
（3）安全性好，副反应率低；
（4）免0疫针次少、抗原用量低等多方面优点。
由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数，所以改良法抗原用量明显少于常规法，从而大大减少了实验成本的消耗。
此外，本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率，发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。
经过后续实验，证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后，抗0体阳性率可达检测孔的90％以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养，并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力，并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。
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