




1.在用 ALP 的 IHC 中,内源性碱性磷酸酶常使靶抗原的特异性染色分辨不清。本品***细胞制片、冰冻***切片和石蜡包埋切片中的内源性碱性磷酸酶。
2.冰冻***切片和细胞制片如外周血、骨0髓和其它体液包含大量造血干细0胞。对于冰冻***切片,建议用丙0酮固定。对于血细胞和骨0髓涂片,建议用丙0酮/甲0醇固定。
3.标本的染色依赖于染色前的***处理。不恰当的固定、冷冻、融化、洗涤、干燥、加热和切片可能产生假阳性。假阳性结果也可能由坏死和变性的细胞产生的交叉反应。
操作步骤
石蜡切片
1. 脱蜡:二甲0苯,室温,2 次,每次 5~10min。
2. 水合 100%、100%、95%、90%、80%、70%乙醇、蒸馏水,每级 3min。
3. 在洗涤缓冲液中润洗 10min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)
5. 继续通用步骤。
冰冻切片
1. 空气中干燥切片,至少 1hr
2. 用前用合适的固定液固定,如果要延长保存时间,固定后在空气中干燥 1hr。 单独包装在铝箔袋中,–70°C 干燥保存,BSA残留检测(***盒),用前从冰箱取出,室温放置至少 1hr。
3. 浸入洗涤缓冲液中 10~15min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)。
5. 继续通用步骤。
运输、储存和有效期
常温运输,室温避光保存,有效期 12 个月。
操作方法
苏0木0精染液细胞学染色步骤:
1. 脱蜡,水化。
2. 将***片浸入苏0木0精染液 1~2 分钟。
3. 换两次蒸馏水,每次浸入 10~20 次。
4. 蓝化:0.5~1%氨水,30 秒~1 分钟,涂片应该变蓝色。
5. 换两次蒸馏水,每次浸入 10~20 次。
6. 1%伊红水溶液 5~10 分钟
7. 蒸馏水快洗
8. 换三次 95%乙醇,每次浸入 10~20 次。
9. 换两次无水乙醇,每次浸入 10~20 次。
10. 换三次二甲0苯,每次浸入 10~20 次。
11. 封片。
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