结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后，尾静脉采集少量血液，分离血0清，进行间接ELISA测定抗0体效价，检测结果见图1。由图中数据可知，新的改良免0疫方法，在第二次免0疫后，抗0体效价即达到1：104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13．0版)进行t检验，统计结果差异极显著(P(0．001)。
二、两种免0疫方式小鼠融合率比较
在细胞融合后约7～10 d可见孔内杂交瘤细胞生长，当细胞融合成片达孔底面积的35％～50％时，benzonase，用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短，但获得的抗0体效价更高。
通过后腿小腿肌肉***免0疫小鼠（视频），每只小鼠***100μl。
备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快***。
第21天按同样方式加强免0疫1针。
备注：每次佐剂和抗原现配现用。
第35天采微量尾血进行ELISA测定，抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内，随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。
抗原制备及纯化
抗原制备: 参照文献［10］制备 MRJ 抗原。复苏pET28a-mrj 转 Rosetta 菌0种 接 种 于 具 Kana 抗 性 的10 mL液体培养基中的，37 ℃ 培养过夜，次日以 1∶ 50转瓶进行扩大培养，当菌液 OD600达 0． 6 时加入浓度为 5 mmol /L 的 IPTG，37 ℃ 诱导 8 h 超声碎裂后进行考马斯亮蓝染色检验，有目的蛋白的大量表达。抗原大量制备及纯化: 以 5 × 10 -4 mol /L 浓度的IPTG，37 ℃ 条件下大量诱导( 200 mL 菌液) 8 h 后收集样品，超声裂解后将所得 MRJ 蛋白过 Ni-IDA 凝胶柱亲和纯化，考马斯亮蓝染色后检测目的蛋白纯度高于 90% ，可用于单克0隆抗0体制备动物免0疫的抗原。
苏州博特龙-benzonase由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是一家从事“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”的公司。自成立以来，我们坚持以“诚信为本，稳健经营”的方针，勇于参与市场的良性竞争，使“博奥龙/Biodragon AbBox”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上，用户至上”的原则，使博特龙在生物制品中赢得了客户的信任，树立了良好的企业形象。 特别说明：本信息的图片和资料仅供参考，欢迎联系我们索取准确的资料，谢谢！