pei转染***-苏州博特龙公司

以高分子聚合物为载体的***传递技术正成为人们研究的方向。但应用的阳离子聚合物转染***，仍然存在转染效率不高和细胞毒性的问题。***新的高分子聚合物转染***是纳米聚合物转染***，由于采用新技术和新材料，具有高0效、安全、低细胞毒性。其原理是：分子内含有许多氨基，在生理PH下会发生质子化，这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷，使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子，并包裹在其中，使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞，pei转染***，形成内含体(endosome)，DNA从内含体释放，进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。通过纳米技术生产出的转染***在纳米尺度表现出结合保护DNA能力强、毒性低的独0特性能。

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

注意事项：

1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。

2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。

3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血0清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。

4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染***用量为 3~5μl，请在正式实验前根据不同培养基用报告***进行优化。

5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至 80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。

6. 立传立转对细胞状态要求较高，如果转染效果不理想，可按 QuickShuttle-Enhanced 的转染方法（见本说明书第 4 页），在细胞贴壁后进行标准转染操作。

哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。

将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微注0射、电穿孔、脂质体介导的转染，以及***近出现的以高分子聚合物为载体的***传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体，通过病毒感0染的方式将外源DNA 导入到细胞中， 其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统***为常用。

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