注意事项：
1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。
2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。
3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血0清的
DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。
4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染***用量为 3~5μl，请
在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告***进行优化。
5. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染，从而可节省
18~24 小时的转染前细胞培养时间。
使用方法：
1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中，质粒转染***，每孔 5~10×104细胞，1ml 完全培养基。备注：如果筛选抗药性稳定细胞系，可以考虑简化的实验步骤，即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染，无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染***分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注：质粒 DNA 和转染***的***适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注：无需其它转染***所需的 10~30 分钟的等候时间。
已有众多的文献报道，脂质体本身会参与细胞生理活动，引起***表达的上调或下调。如参与PKC（蛋白激酶C）通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30)；如***ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):362-8)；如与线粒体膜发生作用(J Biol Chem. 1989 Jan 25;264(3):1508-15)；转染siRNA造成脱靶效应等等。细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小，脂质体这些作用是造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰，甚至影响研究的结论。这已引起了许多研究者的注意。
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