




亲和柱的应用
应用:牛奶中M1的测定
(参考方法GB 541337-2010 食品安全 乳和乳制品中M1 的测定)
样品前处理
称取50g牛奶到具塞离心管中,在水浴中加热到35-37℃,4000转离心15min,除去上层乳脂,全部样品待过柱净化
样品过柱净化
1. 将亲和柱(SBHL-20-0245)连接于10ml或50ml***管下。
2. 将处理好的样品全部通过亲和柱,控制试样以2mL/min-3mL/min稳定的流速过柱。(注意:空气不能通过柱体)
3. 以稳定的流速淋洗柱子两次,赭曲霉亲和柱公司,弃去全部流出液,并使2mL-3mL空气通过柱体。
4. 洗脱,流速为1mL/min-2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。
亲和柱亲和层析原理介绍
组氨酸是具有杂环的氨基酸,赭曲霉亲和柱质量,每个组氨基酸含有一个咪唑基团,这个化学结构带有很多额外电子,对于带正电的化学物质有静电引力,亲和层析是利用这个原理来进行吸附的,亲和配体(也就是填料)上的阳离子(一般是镍离子)带正电对组氨酸有亲和作用。组氨酸标签是原核表达载体上6个组氨酸的区段,这个标签在ph8.0时不带电,对蛋白质的分泌,折叠,功能基本上无影响.能高度亲和镍离子,用于蛋白质的亲和纯化.
亲和柱——亲和层析介绍
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,广东赭曲霉亲和柱,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,赭曲霉亲和柱哪家好,然后选用适当的洗脱液,改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。
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