苏州博特龙-细胞冻存液配方

无血0清冻存液使用方法：

1、收集悬浮细胞或贴壁细胞，离心去除上清培养液。

2、加入适量的细胞冻存液，重悬细胞，调节密度至1-5x10*↑/mL。

3、将加有冻存液的细胞悬液分装至冻存管中。

4、将冻存管直接转移至-80C水箱中冷冻保存。

5、储存条件：2-8C保存，年有效： -20C保存，两年有效。

无血0清冻存液注意事项：

1、请选择对数生长期细胞进行冻存。

2、冻存液加入细胞后，请尽快放入-80C冰箱冻存。

3、本产品冻存细胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。

4、若需长期冻存细胞，请转移至液氮罐中贮存。

5、冻存液中含DMSO成分，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套。

自备材料：

1、细胞计数器

2、细胞冻存管

3、超低温冰箱或液氮

4、超净工作台

操作步骤(仅供参考)：

1、培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有无污染等，取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞，用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数；如为悬浮生长细胞，进行细胞计数。

2、500～1000g离心5min，弃上清。

3、加入适量的通用细胞冻存液，重悬细胞，使细胞浓度达到1～10×106/ml，置于冻存管中，密闭、不要拧的太紧，避免弯曲变形。

4、一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃20min，-20℃30min，-70℃过夜，***后置于液氮罐中长期存储。

冻存细胞复苏步骤

1. 从冰箱中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴槽中快速解冻。

2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，将其中的混合液移至离心管中，1000rmp，5分钟离心收集冻存细胞沉淀，移去上清液（操作时 小心，切勿将细胞沉淀移去）。

3. 加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓加入到细胞沉淀，细胞冻存液配方，轻柔地混匀，将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。

4. 镜检细胞后，可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。

[1]  Tao S C， Yuan T， Zhang Y L， et al. Exosomes derived from miR-140-5p-overexpressing human synovial mesenchymal stem cells enhance cartilage tissue regeneration and prevent osteoarthritis of the knee in a rat model[J]. Theranostics， 2017， 7(1): 180.

产品特色

?  即用型细胞冻存液

?  直接冻存于-80℃冰箱，长期保存（>5年），不需要程序性降温

?  高安全性0，病毒、病菌和支原体等污染可能性低

?  细胞存活率和活力高，批次性差异小