原位复苏方式：
1、从冰箱取出冻存培养板，立即放入37℃水浴槽中快速解冻。
2、待冻存的细胞悬液完全融化后，轻轻吸去细胞冻存液，按照常规换液操作加入新鲜培养基继续进行培养。
细胞冷冻保存方法
冻存管冻存方式：
1、按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
2、按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。
3、取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1，000~2，000 rpm，4℃，3~5 min）。移去离心管中的上清液。
4、加入适量无血0清细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢混合均匀，制成细胞混合液。
5、将离心管中的细胞混合液分装于已标示的冷冻保存管中建议每管1ml或1.5ml。。
6、直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱，冷冻保存。
自备材料：
1、细胞计数器
2、细胞冻存管
3、超低温冰箱或液氮
4、超净工作台
操作步骤(仅供参考)：
1、培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有无污染等，取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞，用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数；如为悬浮生长细胞，进行细胞计数。
2、500～1000g离心5min，弃上清。
3、加入适量的通用细胞冻存液，重悬细胞，使细胞浓度达到1～10×106/ml，细胞冻存，置于冻存管中，密闭、不要拧的太紧，避免弯曲变形。
4、一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃20min，-20℃30min，-70℃过夜，***后置于液氮罐中长期存储。
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