




亲和柱——亲和层析的原理
通常,在开始亲和层析前需要预***行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基。
首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混合,******亲和柱厂家,随后将洗涤缓冲液倒入色谱柱中。洗涤缓冲液通过***非目标生物分子与固定相的较弱结合来去除非目标生物分子。目标生物分子对固定相具有较高的亲和力,因此能够保持与固定相的结合,而不会被洗涤缓冲液冲走。然后将洗脱缓冲液倒入含有剩余目标生物分子的色谱柱中。洗脱缓冲液比洗涤缓冲液,能够从更大程度上减弱靶生物分子与固定相之间的相互作用,******亲和柱哪家好,从而洗脱靶生物分子。洗脱得到的溶液包含洗脱缓冲液和目标分子,称为洗脱液。
固定相一般是凝胶基质,常见的有琼脂糖。为了防止目标分子与配体结合过程中的空间干扰或重叠,首先将含有烃链的***连接到琼脂糖珠(固体支持物)上。这种具有烃链的***通常被称为琼脂糖珠和靶分子之间的间隔基。
亲和柱的应用
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◆ 食品、饲料中***的测定:见相关的(如GB 5009系列的***测定标准方法)、其他行业标准、地方标准等。
◆ ***中***的测定:如《中国药典》2020版 通则2351 ***测定法,品种正文中***、玉米赤霉烯酮检查项。
◆ 食品中农残、营养成分等其他检测项目。
亲和柱亲和层析技术原理
IAC也是色谱技术的一种,可称为色谱技术,是一种利用抗原特异性可逆结合特性的SPE技术,******亲和柱,根据抗原的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将与惰性微珠共价结合,******亲和柱质量,然后装柱,将抗原溶液过亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,然后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原,用适当的缓冲液和合适的保存方法,柱可以再生备用。其提纯效率很高,通常只需一次就可达到1000~10000倍的纯化效果(王泽永,2002)。
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