慢病毒载体构建-博特龙技术有限公司

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

注意事项：

1、Actin抗0体在Western实验后，注意回收稀释的抗0体。回收的抗0体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗0体，包括已经使用过的稀释抗0体，4℃保存。

2、 回收后重复使用的抗0体，使用方法同新鲜稀释的抗0体。如果在重复使用过程中发现抗0体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗0体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗0体。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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抗0体亚型鉴定原理：

抗0体亚型鉴定的原理是利用双抗0体夹心法鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克0隆抗0体或特异亲和纯化的单克0隆抗0体的类和亚类（可区分出 IgG1﹨IgG2a﹨IgG2b﹨IgG3﹨IgM﹨IgA）。采用小鼠抗0体共有位点的二抗包被微孔板，与加入的培养上清中的小鼠抗0体结合，再加入HRP 标记的抗小鼠各类、亚类的抗0体来分别反应，***后用 TMB 底物系统显色并用稀***终止，慢病毒载体构建，再通过酶0标仪检测吸光度来判断被测单克0隆抗0体的类或亚类。

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单克0隆抗0体的大量制备

单克0隆抗0体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。

1、体内诱生法 取Balb/c小鼠。

首先腹腔注0射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克0隆抗0体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注0射器抽取腹0水，即可获得大量单克0隆抗0体。

2、体外培养法

将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克0隆抗0体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克0隆抗0体。但这种方法产生的抗0体量有限。近年来，各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗0体的生产量。