杂交瘤细胞的筛选与克0隆
细胞融合后，培养于添加了 HAT 的选择培养基的 96 孔板中，培养一天后半定量换液，培养基更换时应注意轻缓，第 5 天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆，第 7 天左右，杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 ELISA 检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 MRJ 融合蛋白进行间接 Elisa检测，筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔，有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆，经过 3 次亚克0隆后，获得了能够稳定 分 泌 抗 MRJ 融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm 培养皿的顺序扩大培养，部分细胞用于腹0水制备单抗，部分细胞冻存备用。
1． 9 腹0水效价的测定
1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL，包被Elisa 酶标板过夜，脂质体转染***，以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照，用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价，用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳，用 制 备 的 MRJ单克0隆 抗0体 作 为 一 抗，设置抗0体稀释浓度 分别为1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。进 行Western Blot 检测。
注意事项
1. 本产品设计用于小鼠免0疫，但理论上也可用于部分其他实验动物。客户若要用于其他实验动物，请通过预实验自行确定是否可用以及佐剂用量。
2. 本产品是一种强0效细胞免0疫佐剂，若免0疫后检测不到特异性细胞免0疫应答，请客户***关注抗原质量和检测方法。
3. 本产品仅供动物实验使用，不得用于***免0疫。
货号：KX0210044
规格：1ml
备注：建议常温运输，-20oC保存，无菌取用，有效期18个月。
脂质体转染***-博特龙(推荐商家)由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司是从事“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：刘总。