慢病毒包装原理-苏州博特龙(图)

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实验步骤：

1、弃去板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl，通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。

2 、吸弃板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂 A 和显色剂 B 各50μl，换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。

3 、ELISA***盒特异性好一般肉眼即可观察出结果，看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类。更可将反应终止液（每孔50μl）终止反应后用酶0标仪450nm 测长，630nm 参考波长双波长测定结果，参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类(阳性对照 OD 一般不小于0.8，阴性对照一般不高于0.15，阳性判定标准：样品 OD 大于阴性 OD+0.15，阴性 OD 低于0.05按0.05算)。

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

一、服务内容

1、抗原准备

2、免0疫5只Balb/C小鼠

3、抗血0清检测（ELISA）

二、抗原要求

1. 蛋白抗原：蛋白总量500ug，浓度＞1mg/ml，慢病毒包装原理， 纯度>85%，分子量>10KDa

2. ***等抗原：咨询

三、客户提供材料

1、蛋白抗原、***等

2、抗原信息及相关文献（可选）

四、提交给客户结果

1、实验报告

2、抗血0清（1-1.5ml）

3、少量免0疫前血0清（20ul）

五、服务说明

1、抗血0清检测如果不能达到我们的要求，不进行后续实验服务

2、特殊要求另行协商

3、磷酸化、甲0基化、乙酰基化等特殊修饰单抗另行协商

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注：

抗原注0射以前需要收集一些正常血0清，已备检测抗0体时作为阴性对照。待兔子在新环境中稳定，大概需要四天左右时间，可以进行耳动脉取血。取血量约5ml足矣。

免0疫用的抗原必须纯化，否则影响抗0体的质量。抗原经FCA或FIA充分乳化后才能注0射。将抗原液与佐剂等比例混合后，置于混合器上使之剧烈振荡使抗原充分乳化，乳化过程比较费时、费力，但若乳化不充分，会影响免0疫的效果，振荡后，1000rpm离心一分钟，如水相和油相不分层即可注0射。首0次免0疫用FCA，以后都用FIA。

免0疫方法可采用背部多点注0射法。即于家兔脊柱两旁选4-6点皮下0注0射，每点注0.1ml，间隔2周后再于上述部位选不同点注0射(不要选择临近位点，否则***愈合不好)。每次免0疫的抗原量约100μg。免0疫次数在四五次即可，抗原用量大可以减少次数。