




使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按每针次50μl用量配制)。
备注:推荐使用的抗原用量为
(1)免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg;
(2)亚单位蛋白抗原每针次1-10μg;
(3)免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg;
(4)肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。
2. 37oC水浴中解冻佐剂,充分混匀,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1混匀。
3. 通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0***免0疫小鼠,每只小鼠***100μl。
4. 第7天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次免0疫佐剂和抗原现配现用
5. 第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4+ TH1和/或CD8+ CTL反应。

动物免0疫
使用 quickantibody 作为免0疫佐剂,对小鼠腿部肌肉***免0疫,MRJ 重组蛋白( 1 μg /mL) 与免0疫佐剂各200 μL 混匀免0疫 6-8 周龄 BALB / c 小鼠 4 只,每只*** 100 μL。初次免0疫后第 21 天同样的方法进行第二次免0疫,第 35 天尾静脉取少量血做效价检测,间接 ELISA 检测效价滴度高于 1 ∶ 8 000 则进行冲击免0疫,冲击免0疫直接以不加佐剂的 MRJ 蛋白对小鼠冲击免0疫一次,每只 20 μg。冲击免0疫后 96 h 内取脾0脏细胞做细胞融合。
1. 第21天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。
2. 第35天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。
3. 若抗0体滴度没有达到要求,可在第42天按同样方式加强免0疫1针。备注:通常情况下小鼠只需免0疫2针,重组蛋白新型佐剂,而家兔往往需要免0疫3针。
4. 若免0疫3针,可在第52-56天采微量血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:1000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。备注:佐剂免0疫效果有时也与抗原特性有关,若免0疫3针后仍达不到要求,不建议进行更多针次免0疫。
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