***与仪器
试 剂: pET28a-mrj 转 Rosetta 菌 0种 由 本 实 验 室 所保存。免0疫佐剂 quickantibody 购自北京康碧泉公司;HAT 选择性培养基、HT 培养基、8-Azaguanine 和融合*** 50% PEG 购自美国 Sigma 公司; 胎牛血0清及 PRMI 1640 培 养 基 为 Hyclone 产 品; 辣 根 过 氧 化 物 酶( HRP) 标记山羊抗小鼠 IgG ; 8 周龄雌性健康 BALB / c 小鼠，本实验室饲养; 小鼠骨0髓瘤细胞 SP2 /0 由南京大学赠送，融合前两星期复苏并经 8-Azaguanine筛选; 其他***均为国产分析分析纯。
仪器: 二 氧 化 碳 培 养 箱( Thermo) ; 倒 置 显 微 镜( Olympus) ; 细胞培养耗材，96 孔板、24 孔板、6 孔细胞培养板、移液***( Corning) ; 1 mL 的 A 蛋白层析柱
QuickAntibody-Mouse5W （5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂）
QuickAntibody-Mouse5W用途
通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体，fu水制备，ELISA滴度（Cutoff值为0.1000）可达到1:10000-1:10000000。
QuickAntibody-Mouse5W使用方法（详见使用说明书）
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度（按每针次50μl用量配制）。
备注：推荐使用的抗原用量为
（1）免0疫原性较强的灭活全病毒或全***以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg；
（2）免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg；
（3）偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2. 充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1迅速混匀。
备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。
由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数，所以改良法抗原用量明显少于常规法，从而大大减少了实验成本的消耗。
此外，本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率，发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。
经过后续实验，证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后，抗0体阳性率可达检测孔的90％以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养，并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力，并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。
fu水制备-苏州博特龙(图)由苏州博特龙***技术有限公司提供。苏州博特龙***技术有限公司位于江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前博特龙在生物制品中享有良好的声誉。博特龙取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。博特龙全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。