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1. 按每管1ml分装到细胞冻存管中。
2. 直接放入-70℃冰箱中冻存。
备注:无需程序降温盒或从4℃到-20℃到-70℃冰箱的繁琐程序降温。
3.24小时后转入液氮中冻存。
备注:对于不同细胞,快速细胞冻存液,使用本细胞冻存液也可在-70℃冰箱中保存数周甚至数月,但建议***好尽快转入
液氮中保存。
4.复苏方法同常规细胞冻存液。
备注:对于大多数对DMSO不敏感的细胞,复苏时甚至传代前无需去除细胞冻存液,实际上本细胞冻存
液中某些成分具有一定的促细胞生长特性。
细胞冻存案例:
A431(人0皮肤基底细胞***)、LOVO(人结肠0***细胞)、Jecket、 MH-s(肺泡巨噬细胞)、THP1 人单核细胞型淋巴0瘤、PBMC 、HTR-8、tccsup、293T、293FT、HCT-8、RPTEC、L-WRN、MRC-5、huh7、lm6、MCF-7、MDA-MB-231、MV4-11、MOLM-13、U937、HL60、TG-1、BaF3、32D、牙齿干细0胞、英文名是stem cells from apical illa 、h460、bxpc3、panc1、patu8988、cfpac1。aspc1(人转移胰0腺0***细胞) 人的外周血细胞、单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、monocyte(单核细胞)、Neutrofile、MEF、B16、Hela、HepG2(人肝0***细胞)、RKO(人低分化的结肠0***细胞)、HCT116(人结肠0***肿0瘤细胞)、N2A(Neuro-2a小鼠来源***瘤母细胞)、脂肪细胞、3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)

复苏细胞:
1. 将细胞冻存管由液态氮中取出,置于37度水浴快速溶解回温。此时可准备培养基、无菌15ml离心管、培养瓶。
2. 于生物安全柜内,直接以少量培养基反复冲融,使细胞团块化冻。
3. 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基,再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g,3分钟离心收集细胞。
4. 倒去上清液,以新鲜培养基重悬细胞,移到培养瓶中培养。
5. 隔天更换新鲜培养基,并观察细胞存活状况。

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