细胞融合
取已免0疫小鼠的脾0脏用不完全培养基制成细胞悬液，计数。收集选择生长状态良好的 SP2 /0 骨0髓瘤细胞，制成细胞悬液，计数。将 SP2 /0 骨0髓瘤细胞与免0疫小鼠的脾细胞以 1∶ 10 在 50% 的 PEG1500 作用下融合［8］。加 HAT 选择培养基重悬混匀后滴入到铺有饲养层细胞的 3 块 96 孔细胞培养板。放入37 ℃ ，含 5% 的 CO2 培养箱中培养。
通过后腿小腿肌肉***免0疫小鼠（视频），每只小鼠***100μl。
备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，无缝kelong（***盒），抽入针管后应尽快***。
第21天按同样方式加强免0疫1针。
备注：每次佐剂和抗原现配现用。
第35天采微量尾血进行ELISA测定，抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内，随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。
动物免0疫
使用 quickantibody 作为免0疫佐剂，对小鼠腿部肌肉***免0疫，MRJ 重组蛋白( 1 μg /mL) 与免0疫佐剂各200 μL 混匀免0疫 6-8 周龄 BALB / c 小鼠 4 只，每只*** 100 μL。初次免0疫后第 21 天同样的方法进行第二次免0疫，第 35 天尾静脉取少量血做效价检测，间接 ELISA 检测效价滴度高于 1 ∶ 8 000 则进行冲击免0疫，冲击免0疫直接以不加佐剂的 MRJ 蛋白对小鼠冲击免0疫一次，每只 20 μg。冲击免0疫后 96 h 内取脾0脏细胞做细胞融合。
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