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将上述复合物直接加入到细胞培养基中，轻摇细胞板或用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。在极0少情况下会出现贴壁细胞脱落现象，可先从待转染细胞孔中吸取 500μl 培养基与转染复合物预混后再加入细胞中。若在细胞瓶中进行转染，直接加入到无细胞贴壁的对面或侧面并摇匀即可。
注意事项：
1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。
2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。
3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血0清的
DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。
4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染***用量为 3~5μl，请
在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告***进行优化。
5. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染，从而可节省
18~24 小时的转染前细胞培养时间。
以高分子聚合物为载体的***传递技术正成为人们研究的方向。但应用的阳离子聚合物转染***，仍然存在转染效率不高和细胞毒性的问题。***新的高分子聚合物转染***是纳米聚合物转染***，由于采用新技术和新材料，具有高0效、安全、低细胞毒性。其原理是：分子内含有许多氨基，在生理PH下会发生质子化，这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷，使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子，并包裹在其中，转染***盒，使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞，形成内含体(endosome)，DNA从内含体释放，进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。通过纳米技术生产出的转染***在纳米尺度表现出结合保护DNA能力强、毒性低的独0特性能。
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