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使用方法
1. 将新鲜消化的 BHK-21 细胞接种到 24 孔细胞板中,每孔 1~2×105细胞,1ml 完全培养基。备注:可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染***分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注:质粒 DNA 和转染***的***适用量需要根据不同培养基来优化,lipo3000转染***,但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染***所需的 10~30 分钟的等候时间。
4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中,用加样器吸打混匀。备注:转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。
5. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注:无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。
6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。
北京博奥龙免0疫技术有限公司是一家由留学归国人员创办的生命科学领域高新技术企业,专0业从事新型生化***的研发和销售。公司理念是通过自主创新的品牌产品改变传统实验模式,使生命科学研究变得更轻松、更高0效。公司成立八年多来推出了上万种自主品牌产品,其中包括QuickAntibody?免0疫佐剂、QuickShuttle?转染***、QuickFreezing?细胞冻存液、QuickVerification?胶体金检测卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV? HPV L1抗0体等多种独0特的自主知识产权产品。秉承“专0业、创新”的理念,公司将继续在擅长专0业领域做强做大,为客户提供更多的创新0产品和服务,力争成为国际知0名的品牌生化***公司。

以高分子聚合物为载体的***传递技术正成为人们研究的方向。但应用的阳离子聚合物转染***,仍然存在转染效率不高和细胞毒性的问题。***新的高分子聚合物转染***是纳米聚合物转染***,由于采用新技术和新材料,具有高0效、安全、低细胞毒性。其原理是:分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷,使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞,形成内含体(endosome),DNA从内含体释放,进入细胞质中,再进一步进入核内转录、表达。通过纳米技术生产出的转染***在纳米尺度表现出结合保护DNA能力强、毒性低的独0特性能。

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