Mouse cGMP kit-纽斯特生物技术

***盒储存要求

本***盒所有组分在有效期限内，于4℃稳定保存。为了长效的实验，1000×储液请保存于-80℃。本***盒未提供的必需***

1. 去离子水或蒸馏水。

2. 浓盐酸。

3. 量程在5μL至1000μL之间的精密移液管。

4. 量程为50μL和200μL的中继移液器。

5. 用于稀释储液的一次性烧杯。

6. 刻度量筒。

7. 微孔板振荡器。

8. 吸水纸。

9. 酶标l仪，可读波长450nm，在570nm至590nm之间应有修正。

灵敏度

通过比较10个B0孔平均光密度值(OD)和10个5号管标准品的平均光密度值，计算出灵敏度。cAMP浓度的检测极限通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。

OD(B0平均数) =0.685± 0.003

OD（5号 标准品平均数）=0.604± 0.010

光密度偏差(0-0.4 pmol/mL) =0.081

2 SD"s of the Zero Standard =0.006

灵敏度 =081.0006.0/0.8×0.4 pmol/mL =29.6 fmol/mL

ELISA检测***盒应用定性夹心免l疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗l体，这些抗l体就会与HEV 的多肽抗原结合，Mouse cGMP kit，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗l体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与头一次孵育结合上的HEV IgM抗l体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM抗l体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入***溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量O.D.值，按照本HEV IgM抗l体elisa***盒的测试标准， O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。