







常用的ELISA可以分为以下五大类:①直接ELISA;②间接ELISA;③夹心ELISA;④竞争ELISA;⑤竞争***ELISA。其他的ELISA都隶属于这五类ELISA或由这五类ELISA组合衍生。
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ELISA的基础是抗原或***的固相化及抗原或***的酶标记。
***测定技术的基础在于抗原***之间的特异结合反应。以前用于***测定的抗原通常为各种纯化抗原,而***则为纯化抗原***动物后获得的多******和使用杂交瘤技术得到的单******,而抗原或***的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量的保证才能充分发挥其方法学的优点。
不管是哪一种ELISA,它的操作都由以下几种基本的操作组合而成:①将抗原或***吸附到固相载体上;②加入待检样品以及后续***;③温育;④洗涤去掉游离未结合的反应物;⑤加入酶检测底物;⑥结果的判读。
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多。
测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。
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