过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度***粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原***。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫***前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的***作用。
一般生物***中都含有一定的内源性过氧化物酶和碱性磷酸酶，在使用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶检测系统进行免0疫组化染色时，内源性酶也会催化显色底物，产生非特异性着色。因此，在进行免0疫组化染色实验前将***切片内源性的酶消耗掉是必要的。本品含有对内源性碱性磷酸酶的阻断成分，可避免由内源性碱性磷酸酶造成的非特异性背景染色，适用于细胞涂片、冰冻***切片和石蜡包埋***切片。
注：对于灵敏度要求不是极高的普通实验室的染胶实验，一般染色10-20分钟（可以将100ng含量以上的蛋白染出条带），低背景，无需脱色，直接观察或者拍照；
对于灵敏度要求极高的染胶实验，一般可采用染色1-2小时（可以将10ng含量蛋白染出条带），低背景，无需脱色，快速染色液，直接观察或者拍照；
一般染色2小时后，蛋***带基本不会再加深，而背景会继续加深，所以一般建议染色不要超过2小时。
快速染色液-苏州博特龙(图)由苏州博特龙***技术有限公司提供。苏州博特龙***技术有限公司位于江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前博特龙在生物制品中享有良好的声誉。博特龙取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。博特龙全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。