
ELISA的基础是抗原或抗l体的固相化及抗原或抗l体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗l体仍保持其免l疫学活性,酶标记的抗原或抗l体既保留其免l疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗l体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗l体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗l体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗l体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免l疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗l体。然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。

HBsAg***特点(检测模式:临床抗l体夹心法):包被抗l体为山羊多抗。多抗具有高亲和性和对抗原各种表位的反应性。酶表抗l体为与HBsAg有不同结合位点的鼠复合单位,cAMP antibody,可测得HBsAg变异样品,提高检测的特异性(99.98%)提高检测的灵敏度,应用Parl Ehrich 学说(PEI)HBsAg标准品,对ad标准品的灵敏度为0.05ng/ml对ay标准品灵敏度为0.025ng/ml
1、要保证移液的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排各一支。吸取不同的液体后,要更换头。即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将***盒从冰箱中取出,使各种***都***到室温,以使结果更稳定。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的去吸,减少误差。
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