做亲和柱时，使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同？
Sepharose 4B指4%的琼脂糖
Sepharose CL-4B指4%高度铰链的琼脂糖
他们的区别在于铰链程度不一样，******亲和柱，在亲和层析色谱中，介质铰链程度越高，******亲和柱价格，化学稳定性就应该越高。这样就可以耐受更加苛刻条件洗脱而偶联的配基不会脱落。越是硬质的介质，耐受的流速也会越高。这样更节省平衡洗脱的时间。
亲和柱——亲和层析的应用
抗原和利用抗原、之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上，******亲和柱质量，就可以从中分离其对应的。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低，******亲和柱报价，用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离，而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原，经动物后制备，将与适当基质偶联形成亲和吸附剂，就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。抗原、间亲和力一般比较强，其解离常数为108－10?12M，所以洗脱时是比较困难的，通常需要较强烈的洗脱条件。可以采取适当的方法如改变抗原、种类或使用类似物等来降低二者的亲和力，以便于洗脱。
另外金***球菌蛋白A（ProteinA）能够与球蛋白G（IgG）结合，可以用于分离各种IgG。
亲和柱——原理介绍
亲和柱的功能基于抗原与间可逆的特异性结合反应，使其可从复杂样品基质中特异性地回收目标化合物。上样后，柱中以共价键形式偶联在凝胶上的会与抗原（即目标化合物）特异性结合，杂质不会被结合，大部分随样品溶液流出小柱。通过淋洗的方式除去小柱内剩余杂质后，使用其他洗脱液（根据对应产品说明书选择）进行洗脱即可得到洁净的目标化合物溶液，可直接用于后续检测。
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