








本***盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。简而言之,将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上,细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cAMP或碱性磷酸酶竞争性的结合抗cAMP单克l隆抗l体,已知的cAMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育,洗掉所有***,加入底物进行显色。将多孔板置于酶标l仪上,于450nm或405nm波长下,进行读数。***的光强度与样品中cAMP的浓度呈反比关系。基于cAMP标准品所得曲线,通过测得的光密度可以计算出样品中cAMP的浓度。
ELISA检测***盒应用定性夹心免l疫检测技术,cGMP ELISAkit,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗l体,这些抗l体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗l体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与头一次孵育结合上的HEV IgM抗l体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗l体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入***溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗l体elisa***盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
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