ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多。
测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线ZUI高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数值，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是ZUI理想的检测区域。
不管是哪一种ELISA，它的操作都由以下几种基本的操作组合而成：①将抗原或抗体吸附到固相载体上；②加入待检样品以及后续试剂；③温育；④洗涤去掉游离未结合的反应物；⑤加入酶检测底物；⑥结果的判读。
ELISA操作步骤复杂，影响反应因素较多。
测定小分子量物质常用竞争法，CAMP/CGMP 代检测服务，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。
ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来，得到全世界科研工作者的认可及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化领域的长足发展。Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型hepatitis（HEV）病毒 IgM 抗体ELISA检测。
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