ELISA***盒的试验原理
***盒是固相夹心法酶联吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的***同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，ELISA***盒报价，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
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Elisa***盒操作步骤
1、固相载体的挑选：许多物质可作为固相载体，如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。
2、包被或抗原的挑选：将或抗原吸附在固相载体表面时，要求纯度要好，吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。
3、 酶标记作业浓度的挑选：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法"，在正式试验体系里准确地滴定其作业浓度。
4、酶的底物及供氢体的挑选：对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。
Elisa***盒——Elisa实验常见问题及解决方案
背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值OD<0.2）
1 洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留 洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染。
2 底物污染，未避光保存，出现颜色 弃去底物，酶联ELISA***盒报价，重新配置
3 样品稀释液污染 弃去稀释液，重新配置
4 吸头重复使用，兽药残留ELISA***盒报价，未洗净或消毒不 吸头尽可能一次性使用
5 不正确的孵育时间，温度（尤其是底物孵育的时间） 常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。完全按照说明书要求。
6 偶联***（strept***idin-HRP）浓度过高 按照说明书调整到合适的浓度
7 ELISA板子不正确的贮存 酶标板贮存于2-8 ℃；使用结合力低点的Elisa板
8 没有正确封闭 在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间
9 样本溶血严重 建议使用非溶血或轻微溶血样本，严重溶血样本会导致背景偏高。
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