抗l体的层析分离步骤基本
都可以采用标准化的三步曲：步用Protein A介质进行抗l体捕获和浓缩；第二步用离子交换进行中间纯化以去除多聚体，宿主蛋白等杂质；第三步是精纯去除剩余DNA，Endotoxin，Protein A 等微量杂质。在这三步抗l体的分离纯化过程中，步的Protein A亲和捕获占据分离纯化成本80%以上，也是下游分离纯化的瓶颈所在。亲和层析之所以成本高的主要原因：首先是Protein A 价格昂贵，其价格是普通层析介质十几倍；第二，Protein A使用寿命短，一般离子交换填料使用寿命多达1000次，而亲和填料寿命通常在100-200次；第三，Protein A 用于抗l体的捕获和浓缩，需要处理大体积的发酵液，而亲和步骤载量往往又低于阴阳离子交换层析，使得亲和层析介质使用量比中间纯化或精纯的要多得多。因此，要降低抗l体的生产成本，解决抗l体的生产瓶颈关键在于改进步Protein A 亲和捕获。
纳微 Protein A亲和层析介质
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疏水层析
生物分子表面大都有或强或弱的疏水区域，在不同环境下，分子尺寸排阻填料，与各种疏水介质产生不同强弱的结合
高离子强度可加强疏水性
跟离子交换相反，高盐吸附，低盐洗脱;洗脱样品又可直接或稍加稀释后加上其他层析柱，作为连接层析步骤的桥梁，取代盐析沉淀技术
比反相层析的配体密度低很多，无须洗脱，分子尺寸排阻填料哪家好，保存生物活性
配体种类繁多，很难预测哪一种、哪一个条件适合，可用疏水层析试盒选择介质
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